Повышена чувствительность и специфичность определения общей антиоксидантной активности (ОАОА) сыворотки крови (патент Республики Беларусь на изобретение № 19669, МПК (2006.01): G 01N 33/49; авторы изобретения: Н.Литвинко, Д.Герловский, Л.Скоростецкая; заявитель и патентообладатель: Государственное научное учреждение «Институт биоорганической химии НАН Беларуси»).
Запатентованное изобретение относится к области клинической биохимии, биотехнологии и медицины, в частности — к созданию композиции ингредиентов, которая может быть использована для количественной оценки, так называемой, «антиоксидантной ёмкости» крови.
В процессе жизнедеятельности в клетках организма постоянно образуются различные активные формы кислорода (АФК), например — «супероксид-анион-радикалы» и «гидроксил-радикалы». Последние являются наиболее токсичными. «Гидроксил-радикалы», например, способны инактивировать белки, разрушать некоторые полисахариды и стимулировать мутагенез за счет накопления окислительных повреждений в ДНК.
Степень защиты клетки от повреждающего действия экзогенных АФК можно оценить по уровню активности панкреатической фосфолипазы A2 (ФЛА2).
Предложенная композиция для определения ОАОА сыворотки крови содержит в своем составе: 1) эмульгированные желчной кислотой и облученные ультрафиолетом мицеллы фосфатидилхолина яичного желтка, 2) ФЛА2, 3) метгемоглобин, 4) кальций хлористый, 5) 0,05 M трис-HCl буфер. Соотношение всех ингредиентов тщательно подобрано.
Применение описанной выше композиции для определения ОАОА сыворотки крови позволяет по спектральному сдвигу в области полосы поглощения Соре метгемоглобина провести измерение активности ФЛА2, что является индикатором изменений при перекисном окислении фосфолипидов и обеспечивает достижение результата с высокой специфичностью.
При этом важно то, что перекисное окисление липидов определяется на ранней стадии, в то время как в прототипе данного изобретения регистрируются только конечные окисленные липиды.
Положительным эффектом запатентованного изобретения является также то, что процедуру определения ОАОА можно проводить на небольшом количестве сыворотки крови.