«Способ идентификации доминирующего вида фитопатогена лесных древесных пород» (патент Республики Беларусь № 21100, МПК (2006.01): C 12Q 1/68, G 01N 27/26; авторы изобретения: М.Я.Острикова, О.Ю.Баранов, В.Ю.Падутов, С.В.Пантелеев; заявитель и патентообладатель: Государственное научное учреждение «Институт леса Национальной академии наук Беларуси»).
Изобретение относится к области молекулярной фитопатологии и может быть использовано в лесном хозяйстве для ранней диагностики и идентификации фитопатогенов в растительных и почвенных образцах.
Поясняется, что в основе молекулярно-генетического метода лежит анализ молекул ДНК патогена. ДНК-анализ в настоящее время является ведущим и наиболее надежным способом видовой идентификации возбудителя того или иного заболевания.
Предложенный авторами «Способ идентификации …» заключающийся в следующем: 1) осуществляют сбор экспериментального материала; 2) выделяют суммарную ДНК; 3) методом полимеразная цепная реакция (ПЦР) с использованием пар праймеров (ITS1-ITS4, ITS1-ITS2 и ITS3-ITS4) амплифицируют регион рибосомальной ДНК (включающий «18S pРНК — ВТС1 — 5,8S pРНК — ВТС2 — 28S pРНК»); 4) полученные амплифицированные ПЦР-продукты разделяют электрофоретически в агарозном или полиакриламидном геле; 5) производят необходимое окрашивание; 6) определяют размеры ампликонов; 7) идентифицируют по ним доминирующий вид фитопатогена (в соответствии с таблицей описания).
Как отмечается авторами, используемый «Способ идентификации …» (с применением данного метод видовой диагностики) характеризуется рядом преимуществ: а) быстротой выполнения (5-6 ч) по сравнению с другими методами (12-24 ч); б) относительной дешевизной; в) может быть адаптирован к большинству имеющегося в молекулярно-биологических лабораториях оборудования; г) может быть применим при работе с любыми типами образцов; д) позволяет выявлять и идентифицировать отдельные виды фитопатогенов и их ассоциации.